简述CD4+T细胞活化的条件
抗原特异性CD4~+T细胞体外活化条件优化
髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)是一种表达在中枢神经系统(CNS)髓鞘膜和少突胶质细胞最外层的跨膜蛋白,体内含量虽仅为髓鞘总蛋白的0.05%-0.1%,但却具极高的免疫原性,是致脑炎的关键成分。MOG的胞膜外区有三个致脑炎的抗原决定簇,MOG_(35-55)多肽是其中之一,它可诱导C57BL/6小鼠出现典型的慢性-非缓解性实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE),人类多发性硬化症(MS)的动物疾病模型,主要由髓鞘抗原或其肽段诱导自身反应性T细胞介导的CNS炎症、脱髓鞘和轴突损伤等为特征的自身免疫性疾病。目的:比较体外不同活化方案诱导抗原特异性CD4~+T细胞活化的细胞活性和增殖率,探索体外抗原特异性T细胞最优活化方案。方法:C57BL/6(多克隆背景)和转基因2D2(单克隆背景)小鼠脾脏淋巴细胞(LC)体外分别经MOG_(35-55)刺激活化,不同的淋巴细胞(LC,即效应细胞)与树突状细胞(DC,即抗原提呈细胞APC)比例(1:1、10:1、50:1、100:1),辅以不同的细胞因子微环境(rmIL-7 and rmIL-15with orwithout rmIL-2);Annexin VPE/7AAD法检测淋巴细胞活性、CFSE稀释法检测活化细胞增殖效率。结果:C57BL/6小鼠LC:APC不同比例组加rmIL-2组的淋巴细胞比例均略高无rmIL-2组,但淋巴细胞凋亡(Annexin V-PE+)或死亡率(7AAD+)也略高于无rmIL-2组;低比例组(LC:APC=1:1、10:1)中淋巴细胞增殖指数(proliferation index,PI)加rmIL-2组也略高于无rmIL-2组,中、高比例组(LC:APC=50:1、100:1)区别不大;但差异有显著性的仅LC:APC=50:1组加rmIL-2的早期凋亡率高于无rmIL-2组(3.125%±0.4992%vs 1.65%±0.2082%,p=0.000,n=4)。2D2小鼠LC:APC不同比例组加rmIL-2组的淋巴细胞比例也略高于无rmIL-2组,仅LC:APC=50:1组差异有显著性(54.267%±0.3512%vs 48.167%±1.9732%,p=0.016,n=3);但淋巴细胞活性和增殖率均略低于无rmIL-2组,差异无显著性。结论:rmIL-2在MOG特异性CD4~+T体外活化中对细胞活性和增殖率无显著提高作用。